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淀粉酶活力的測(cè)定

來(lái)源:印染在線 發(fā)布時(shí)間:2009年06月05日
(1)測(cè)試原理:淀粉遇碘產(chǎn)生藍(lán)色,可以在一定量的淀粉中加入不同量的淀粉酶制劑,一定時(shí)間后,不出現(xiàn)藍(lán)色且酶制劑用量最少的那個(gè)試液可以認(rèn)為剛好將淀粉全部分解,可根據(jù)酶制劑的用量、淀粉的用量以及反應(yīng)時(shí)間來(lái)計(jì)算該淀粉酶的活力。 (2)儀器與試劑: 儀器:恒溫水浴鍋;比色管(或試管);溫度計(jì)。 淀粉試液:分別稱取可溶性淀粉工g(精確至0。01g)和食鹽5g,用少量蒸餾水分別溶解后,移人1000mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻備用。 c(½I2)=0.1mol/L.碘溶液:稱取1.3g碘片及3.5g碘化鉀,溶于lOOmL蒸餾水中,在棕色瓶中保存。 酶制劑溶液:稱取(精確至O.01g)淀粉酶制劑25g(或吸取25mL),溶解后移人1000mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻備用。 (3)操作步驟:在已編號(hào)的10只比色管中分別加人5mL淀粉試液,另取一只比色管,內(nèi)盛蒸餾水,插入溫度計(jì)。一起放人恒溫水浴鍋中保溫(BF一7658 酶 60℃,胰酶40℃),當(dāng)溫度恒定在所需溫度后,按管號(hào)分別加入1.0—1.9mL(間隔為O.1mL)配制好的酶制劑溶液,計(jì)時(shí)保溫60min。60min后,在每管中加人數(shù)滴c(½I2)=0.1mol/L碘溶液。記錄不呈藍(lán)色且加入酶制劑溶液最少的試管中加入酶制劑溶液的體積V(mL)。 (4)計(jì)算: 酶活力=[mg/(g·h)]=W1×5/(W2/1000)×V×1=5000W1/W2×V式中:wl一一稱取淀粉的質(zhì)量,g; w2一一稱取酶制劑的質(zhì)量,g; V一一不呈藍(lán)色試管中淀粉酶用量最少所加酶制劑溶液的體積,mL。 (5)說(shuō)明: ①由于酶制劑的活力變化較大,如完全按上述操作,所加酶制劑溶夜體積可能不一定在測(cè)試范圍中,因此可以先加大酶制劑溶液體積的間隔,找到一個(gè)大
致用量,再在其左右用0.1mL的間隔較精確測(cè)定使淀粉剛好完全分解時(shí)所加入酶制劑溶液的體積。 ②酶活力也可用酶的轉(zhuǎn)化力來(lái)表示,即計(jì)算每小時(shí)每克(或毫升)酶制劑轉(zhuǎn)化淀粉的克數(shù)。

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