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印染廢水是目前主要的水體污染源之一。它含大量的有機(jī)污染物,排入水體將消耗溶解氧,破壞水生態(tài)平衡,危及魚類和其它水生生物的生存。沉于水底的有機(jī)物,會(huì)因厭氧分解而產(chǎn)生硫化氫等有害氣體,惡化環(huán)境。染料廢水的高色度會(huì)影響水體中動(dòng)植物的生長(zhǎng)繁殖,妨礙水體的自然凈化,破壞水體的生態(tài)系統(tǒng)。由此可見,染料脫色是印染廢水治理的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]。由于微生物繁殖速度快,適應(yīng)性強(qiáng),利用其進(jìn)行廢水處理,成本低廉,許多學(xué)者[2～4]致力于分離選育對(duì)染料有較高的降解活性的菌株。吳贊敏等人[4]于2005年分離得到一種可以降解蘭納素藏青B-01的細(xì)菌x3,其脫色率可以達(dá)到65%。在印染廢水處理中,活性染料是較難脫色的染料之一,筆者主要針對(duì)活性藍(lán)染料有脫色能力的菌株,進(jìn)行分離篩選,并對(duì)其降解特性進(jìn)行研究。1試驗(yàn)材料1.1菌種來源及藥品菌種取自某印染廠廢水處理站曝氣池內(nèi)污泥?；钚运{(lán)染料(以下均稱染料),牛肉膏(生化試劑),蛋白胨(生物試劑),瓊脂(生化試劑),氯化鈉(分析純),葡萄糖(分析純),淀粉(分析純),氫氧化鈉(分析純),K2HPO?43H2O(分析純),Na2HPO?412H2O(分析純),CaCl?22H2O(分析純)。1.2試驗(yàn)儀器78-1型磁力加熱攪拌器(青島樂清樂成電器廠),UV-2401PC紫外分光光度計(jì)(日本島津),高速離心機(jī)LG10-2.4A(北京醫(yī)用離心機(jī)廠),壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠),酸度計(jì)PHS-3C(天津市盛邦電器廠),SPX-150B-Z振蕩培養(yǎng)箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)。2實(shí)驗(yàn)步驟與方法2.1污泥的馴化取印染廠污水處理站的曝氣池混合液,加入適量活性藍(lán)染料馴化,調(diào)節(jié)溶液pH值為7.0～8.0,采用生活污水做補(bǔ)充碳源,常溫下馴化培養(yǎng),并注意觀察溶液顏色的變化。通過對(duì)污泥的馴化培養(yǎng),使污泥中以染料為營(yíng)養(yǎng)源的細(xì)菌大量繁殖,那些對(duì)染料不適應(yīng)的微生物被淘汰。在馴化培養(yǎng)4d后,溶

液中染料的顏色明顯降低,這說明在所制備的活性污泥的馴化液中存在可以降解染料的菌株。2.2脫色菌的純種分離以及富集培養(yǎng)首先,制備選擇性培養(yǎng)基,配方見表1。

將混合均勻的活性污泥制備成濃度為10-1～10-6的菌液。然后取10套無菌培養(yǎng)皿編號(hào),10-4～10-6各3個(gè),另一個(gè)為空白對(duì)照。取1支1mL無菌移液管從濃度最小的10-6菌液開始,按濃度從小到大的順序分別吸取0.5mL菌液于相應(yīng)編號(hào)的培養(yǎng)皿內(nèi)。再將已經(jīng)冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基傾倒入相應(yīng)的培養(yǎng)皿中,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基和菌液充分混合,冷凝成平板后,倒置于30℃的生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2d。兩天后可觀察到培養(yǎng)皿表面有若干菌落形成,然后將比較清晰的菌落在選擇性培養(yǎng)基(表1)上進(jìn)行平板劃線[5],經(jīng)過多次反復(fù)劃平板后得到單菌株,并對(duì)菌株進(jìn)行編號(hào),記錄菌落形態(tài)(表2)。然后將得到的菌株接種[6]到液體富集培養(yǎng)基(表1)中,在一定溫度下富集培養(yǎng),用以進(jìn)行各種條件下的脫色性能試驗(yàn)研究。2.3優(yōu)勢(shì)脫色菌的篩選用紫外分光光度計(jì)對(duì)活性藍(lán)染料的波長(zhǎng)進(jìn)行掃描,得到該染料的最大吸收波長(zhǎng),在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)得染料溶液的最大吸光度Abs值。配制染料濃度為20mg/L-1的液體染料培養(yǎng)基,將5株菌分別接種到液體染料培養(yǎng)基中,接種量為10mL,作脫色觀察。每0.5d取該菌培養(yǎng)液高速離心分離,取上層清液,測(cè)最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度Abs值,以未接種菌體的培養(yǎng)液做空白,計(jì)算該菌的脫色率。以脫色率表示該菌的脫色能力:脫色率=(A-B)/A×100%式中,A表示不接種菌液的最大吸光光度,B表示接種過菌液的最大吸光光度。降解3d后,各菌株的脫色性能試驗(yàn)結(jié)果見圖1。