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1．4．2復(fù)配精練酶水解棉籽殼

由于酸性條件(pH=6．0)時，果膠酶無活力，所以在酸性條件下，果膠酶不參與復(fù)配，紙漿酶和纖維素酶在pH值6．0下測得的活力分別是lU／mL和4U／mL，復(fù)配。堿性條件(pH=10．0)下三者都參與復(fù)配，紙漿酶、果膠酶與纖維素酶在pH值10．0下測得的活力分別是0．06U／mL、0．79U／mL和1．66U／mL，復(fù)配。浴比為1：10，水解時間為10h，每隔1h取樣測酶解液中還原糖的量，以相應(yīng)的僅用pH值緩沖液處理的為空白對照。

1．5酶氧水解棉籽殼

為進一步驗證酶氧煮漂一浴的可行性，調(diào)節(jié)pH值分別為5、7、9，分別加人雙氧水，雙氧水總質(zhì)量濃度為20g／L(100％)，酶液按l：1：1體積比的比例添加，每種酶加0．5mL。浴比l：10，分別在50、6O、7O℃下水解棉籽殼，每隔2h取樣測酶解液中的還原糖的量。以不加雙氧水的酶解體系作參照，水解10h計算棉籽殼失重率和還原糖得率。

2結(jié)果與討論

2．1精練酶復(fù)配前后水解棉籽殼

圖1(a)表明纖維素酶水解棉籽殼最有效，產(chǎn)生的還原糖量最高；而紙漿酶和果膠酶酶解液中還原糖得率不高，且變化平緩。紙漿酶和果膠酶水解10h后，還原糖質(zhì)量濃度僅達到1．8g／L和1．5g／L。纖維素酶水解10h后，還原糖質(zhì)量濃度達到了8．9g／L，分別是紙漿酶和果膠酶水解后糖質(zhì)量濃度的4．9和5．9倍。這可能與酶的pH值和溫度穩(wěn)定性有關(guān)。果膠酶在堿性條件下穩(wěn)定性極差，雖然pH值l1．0是其最適反應(yīng)pH值，但是30min后酶液就完全失活。紙漿酶的pH值穩(wěn)定性較佳，但是在70℃其溫度穩(wěn)定性也不佳，保溫1．5h后僅剩85％的活力J，所以水解作用不大。另一個原因可能是棉籽殼的化學組分中纖維素

含量要高于半纖維素，因此纖維素酶比木聚糖酶水解更有效。

圖1(b)復(fù)配酶水解棉籽殼的情況。復(fù)配后，水解效果大大提高。在pH值為6．0的條件下，紙漿酶和纖維素酶復(fù)配的水解效果明顯優(yōu)于單一酶的作用；堿性條件下3種酶參與復(fù)配，水解效果進一步提高。

表1為不同pH值條件下，復(fù)配酶對失重率和還原糖得率的影響。

從表l可見，不同pH值的緩沖溶液對去除棉籽殼是有效的。隨著pH值升高，棉籽殼的失重率也得到提高。pH值為11．0時，棉籽殼失重率達到8．1％，還原糖得率為2．3％。這是因為半纖維素等棉籽殼組分可以在堿性條件下溶出，從而有利于棉籽殼的去除。單一酶水解中，果膠酶對棉籽殼的去除無任何貢獻；纖維素酶和紙漿酶分別有3．3％和0．8％的棉籽殼失重率。由于3種酶的最適反應(yīng)溫度在60—70℃之間，而最適pH值差距較大，且pH值穩(wěn)定性也大不相同，所以復(fù)配的時候需要兼顧各種酶的pH值穩(wěn)定性和溫度穩(wěn)定性。在pH值6．0條件下，紙漿酶與纖維素酶復(fù)配，兩者混合水解10h后，棉籽殼失重率達6．2％，是單一纖維素酶3．3％失重率的2倍；在堿性條件pH值10．0下，3種酶進行復(fù)配，棉籽殼的失重率提高到l0．3％。以上結(jié)果表明，酶液經(jīng)過復(fù)配后，對棉籽殼的水解效果增強，去除作用更顯著。棉籽殼組分復(fù)雜，單一酶對其作用不大，而經(jīng)過適當?shù)膹?fù)配，能有效提高棉籽殼的失重率。但是，精練酶復(fù)配需要兼顧各種酶的穩(wěn)定性和最適反應(yīng)條件，為了在同的反應(yīng)條件下起催化作用，有些酶用量會偏大，成本升高，具有一定局限性。