2．3木聚糖酶．
木聚糖(或半纖維素)是自然界中最豐富的非纖維素類多糖物質(zhì)，是植物細(xì)胞壁的主要組分．在次生胞壁里，木聚糖與木質(zhì)素及其他多糖類物質(zhì)f如果膠、葡聚糖)等共價(jià)交聯(lián)．而木聚糖酶通過協(xié)同增效作用可實(shí)現(xiàn)對木聚糖的催化水解．[2Ol"刀目前，木聚糖酶應(yīng)用最多的是對紙漿的輔助漂白，以有效降解和吸附沉積在纖維表面的木聚糖，使漂白劑更好地接近殘余木質(zhì)素，還可降解掉與紙漿中殘余木質(zhì)素連接的半纖維素，破壞木質(zhì)素碳水化合物(LCC)，增大纖維間的孔隙，有利于已溶解木質(zhì)素的脫除．
12I在紡織領(lǐng)域主要用于苧麻、亞麻、黃麻等麻類織物的退漿和煮練，可以有效降解半纖維素類雜質(zhì)，使之溶解．有研究表明l8145，利用聚糖酶結(jié)合纖維素酶在漂白之前對其進(jìn)行預(yù)處理可以大幅提高織物白度，原因是木聚糖酶除去多糖類物質(zhì)以后，增大了纖維內(nèi)部的空隙，增加了漂白溶液在纖維中的含量，使得漂白劑更容易與木質(zhì)素反應(yīng)并將其去除．而對棉織物進(jìn)行同樣的預(yù)處理也可以在一定程度上增加白度，原因是木聚糖酶使棉籽殼發(fā)生了部分水解，有利于在后續(xù)漂白過程中漂白劑與色素雜質(zhì)的充分接觸，更好地進(jìn)行漂白．
2生物酶的固定
生物酶用于棉織物的前處理可以節(jié)能降耗，減少對環(huán)境的污染．從實(shí)際生產(chǎn)來看，并沒有完全取代化學(xué)試劑而得以廣泛應(yīng)用．主要原因是市場上提供的酶制劑價(jià)格昂貴，以游離酶居多．而游離酶在使用中穩(wěn)定性差，且處理以后和雜質(zhì)混在一起難以回收，即便還有活力也不能多次利用，造成使用成本增加．采用固定化技術(shù)可以克服游離酶的諸多使用不足，還可以實(shí)現(xiàn)活性酶的回收和重復(fù)利用．隨著固定化技術(shù)的發(fā)展，還可實(shí)現(xiàn)對含酶菌體或活細(xì)胞的固定，但對酶本身的固定仍較常見.
傳統(tǒng)的酶固定化方法大致可分為吸附法、交聯(lián)法、包埋法、共價(jià)結(jié)合法．其中，吸附法和包埋法固定條件溫和，對酶的催化活性影響較小，酶活回收率高，但是酶與載體之間結(jié)合較弱，在高溫等劇烈條件下易于脫落；交聯(lián)法和共價(jià)結(jié)合法則是通過交聯(lián)劑(如戊二醛)或酶分子本身所具有的官能團(tuán)與載體形成共價(jià)鍵實(shí)現(xiàn)不可逆結(jié)合，有良好的穩(wěn)定性及重復(fù)使用性，也是目前研究最為活躍的一類酶固定化方法．㈣此外，采用新型載體提高固定化酶的性能也是關(guān)注的焦點(diǎn)．
2．1葡萄糖氧化酶的固定
科研工作者已經(jīng)采用不同的方法嘗試將葡萄糖氧化酶固定于多種不溶性的載體如硅膠[241、絲素膜、活性炭素等-26]上，但所得固定化葡萄糖氧化酶主要用于制備電化學(xué)生物傳感器．筆者所了解到的最早將葡萄糖氧化酶進(jìn)行固定并用于棉織物漂白的是K．0p—wis等人．[271349他們分2步將葡萄糖氧化酶固定于棉織物上：(1)將退漿棉織物置于三聚氯氰(2，4，6一三氯一1,3，5一三嗪)和1，4一重氮二環(huán)(2，2，2)辛烷(DABCO)的1，4一二氧雜環(huán)乙烷溶液中，于室溫下攪拌3h，之后用l，4一二氧雜環(huán)乙烷反復(fù)沖洗，并用丙酮萃取6h，徹底除去三嗪和未溶解的DABCO；(2)將風(fēng)干的棉織物浸沒于葡萄糖氧化酶的硼酸／鹽酸緩沖溶液中，于室溫下攪拌1h，然后冷卻、水洗、干燥，即得固定化酶．在漂白時(shí)將固定化酶和游離酶置于漂液中即可，但是由于所用試劑存在極大的安全隱患，因此有必要進(jìn)一步研究．而T．Tzanov等人鎬以疏松多孔的氧化鋁和玻璃泡沫顆粒為載體，戊二醛為交聯(lián)劑對葡萄糖氧化酶進(jìn)行了固定：先將載體于45c(=置于4％一氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液中硅烷化，反應(yīng)24h后水洗，干燥后，在室溫下于2％戊二醛水溶液中浸沒2h，最后將載體置于酶液中，室溫下反應(yīng)l6h，多次水洗后即得固定化酶．通過2種載體固定化酶產(chǎn)生HO的對比發(fā)現(xiàn)，玻璃泡沫載體比氧化鋁載體好，但是對于后續(xù)漂白過程中的攪拌通風(fēng)及堿性等條件抵抗力較差，不利于重復(fù)利用；而氧化鋁載體雖然耐劇烈條件能力較強(qiáng)，但是重復(fù)利用5次之后，酶活急劇下降，因此固定效果也不是很理想，還有待進(jìn)一步研究．
2．2漆酶的固定
漆酶固定工藝對固定化酶的催化活性有很大的決定作用．采用何種工藝進(jìn)行固定，除了酶的活力，還要考慮最終的催化效果、失活與再生能力、固定化試劑的毒性等因素，更重要的還取決于所使用的固定化載體材料．國內(nèi)外對漆酶固定的研究在近些年有不少報(bào)道，所采用的載體有殼聚糖[281、海藻酸鈉凝膠[291及PVAtol等，其中文獻(xiàn)[31]還對近幾十年來科研工作者利用不同支撐材料固定漆酶的研究成果進(jìn)行了綜述．
目前，固定化漆酶應(yīng)用較為成熟的是在廢水脫色[32-33]方面，因此對這方面研究中漆酶的固定做一簡要介紹．8印染助劑27卷A．Kunamneni等人[3211∞利用環(huán)氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物為載體，將漆酶進(jìn)行共價(jià)固定的研究卓有成效，不但顯著提高了漆酶對pH、溫度、儲(chǔ)藏時(shí)間的穩(wěn)定性，而且重復(fù)利用17次之后酶活性仍保持在84％．他們將酶制劑DeniLiteIIS溶解于0．1mol／L醋酸鈉緩沖溶液(pH=4．51中，通過離心和過濾使之最終質(zhì)量濃度為5g／L，然后用1mol／L碳酸鈉緩沖溶液將其pH值調(diào)至9．0，放人載體[m(漆酶)：m(載體)=1：1O，]于室溫下攪拌反應(yīng)24h，然后過濾，用0．1mol／L醋酸鈉緩沖溶液清洗，真空干燥即得．WANGPing等人[33]150先將漆酶包埋在與聚乙二醇混合的海藻酸鈉／明膠顆粒中(擠入到2．0％的CaC1溶液中，迅速成形)，在4℃下與交聯(lián)劑戊二醛反應(yīng)2h，然后用0．1mol／L(pH=7．0)磷酸鹽緩沖溶液反復(fù)沖洗顆粒，干燥即得固定化酶．
2．3木聚糖酶的固定
朱啟忠等人曾嘗試采用殼聚糖、海藻酸鈉為載體，結(jié)合微膠囊技術(shù)對木聚糖酶進(jìn)行固定1，但是研究結(jié)果是酶固定率不太理想(39．4％)．而采用共價(jià)結(jié)合法則可以進(jìn)一步提高酶活回收率，但是共價(jià)法通常需要通過接枝反應(yīng)在載體中引人具有可以與酶反應(yīng)的基團(tuán)．最近A．Sarbu等人[35]通過自由基過氧化物的激發(fā)將丙烯酰胺接枝到醋酸纖維薄膜上，引入能夠與交聯(lián)劑反應(yīng)的一CONH，為獲得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能．到目前為止，對木聚糖酶的固定研究還不多，其在工業(yè)中的應(yīng)用還有待研究．
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