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蜜環(huán)菌漆酶對蒽醌類染料的脫色條件優(yōu)化

來源:印染在線 發(fā)布時間:2012年10月10日

1.6染料脫色方法

脫色條件采用:選用的脫色體系總體積為10mL,用檸檬酸-Na2HPO4緩沖液把脫色體系的pH值調(diào)至5,給酶量0.1 U·mL-1,溫度為30℃,活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR的濃度分別采用50 mg·L-1和100 mg·L-1.脫色率的計算方法:采用紫外分光光度計在染料的最大吸收波長下測出吸光度,根據(jù)標準曲線轉化成相應的質(zhì)量濃度,染料脫色率(%)的計算公式[16]:脫色率(%)=(A0-At)/A0×100%式中:A0、At分別表示初始時刻和t時刻染料在特征波長處的吸光值濃度吸光值.實驗重復3次,取平均值.

2·結果與分析

2.1時間對脫色率的影響

從圖3可以看出活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR的脫色率隨時間增加而增大,活性艷藍X-BR和活性艷藍KN-R分別到第6 h和第5 h后的脫色率不再隨時間增加而增加,維持在一個穩(wěn)定范圍;這時的活性艷藍KN-R脫色率達83.02%,活性艷藍X-BR脫色率達50.02%.因此以后實驗活性艷藍KN-R脫色時間選為6 h,活性艷藍X-BR脫色時間選為5 h.

2.2溫度對脫色率的影響

從圖4中看出隨著溫度的升高,活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR的脫色率都在逐漸升高,當溫度為30℃時它們的脫色率都達到最高.而當溫度繼續(xù)升高,脫色率迅速下降這是因為溫度升高酶的失活越來越明顯,能用于催化反應的酶減少因而脫色率降低.
  
2.3 pH值對脫色的影響

從圖5可以看出pH值的變化對活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR的脫色率有很大影響,pH在4~6之間它們的脫色效果都很好,活性艷藍KN-R的最適pH為5,活性艷藍X-BR的最適pH為4.這是因為pH值的變化會改變離子平衡和蛋白質(zhì)的解離狀態(tài),對酶的活性造成很大影響.

2.4染料濃度對脫色的影響

從圖6中可以看出隨染料的質(zhì)量濃度增加,活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR脫色率都在增加,活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR分別在80mg·L-1和50 mg·L-1時脫色率達到最高,分別為84.2%和52.2%.但是染料濃度繼續(xù)增大脫色率反而降低,這說明高濃度的染料對蜜環(huán)菌漆酶催化脫色的能力有一定的抑制作用.
 
2.5酶量對脫色的影響

由圖7看出隨著酶量的增加,脫色率亦逐漸增加,活性艷藍KN-R和活性艷藍X-BR分別在酶量0.25 U·mL-1和0.5 U·mL-1時后增加緩慢.原因是酶的用量決定催化反應的速度,用量增加能與底物結合的活性中心也就增多,當酶飽和以后反應速度就不會隨酶量增加而加快.

2.6最優(yōu)條件下脫色效果

活性艷藍KN-R在溫度為30℃,染料濃度為80mg·L-1,酶活為0.25 U·mL-1,pH值為5的條件下作用6 h,脫色率為90.33%.活性艷藍X-BR在溫度為30℃,染料濃度為50 mg·L-1,酶量為0.5U·mL-1,pH值為4的條件下作用5 h,脫色率為70.03%.

3·結論

(1)實驗研究了蜜環(huán)菌漆酶對活性艷藍KN-R的脫色條件,表明蜜環(huán)菌粗漆酶液對活性艷藍KN-R有很好的脫色效果.在溫度為30℃,染料濃度為80mg·L-1,酶量為0.25 U·mL-1,pH值為5的條件下作用6 h活性艷藍KN-R在脫色率能達90%以上.

(2)實驗研究了蜜環(huán)菌漆酶對活性艷藍X-BR的脫色條件,表明蜜環(huán)菌粗漆酶液對活性艷藍KN-R有較好的脫色效果.在溫度為30℃,染料濃度為50mg·L-1,酶量為0.5 U·mL-1,pH值為4的條件下5 h活性艷藍KN-R在脫色率能達70%以上.

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