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1.2.2 純化

將分離挑取的單菌落在平板上劃線、純化,并鏡檢純度.經(jīng)過多次挑單培養(yǎng)后得到純培養(yǎng).

1.2.3 脫色能力的測定

用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基搖床振蕩培養(yǎng)菌體到一定的濃度進行純種擴大培養(yǎng),取1 mL培養(yǎng)好的菌液,加到含20 mL脫色培養(yǎng)基的100 mL錐形瓶中, 30℃靜置培養(yǎng), 24 h后取樣, 3 500 r/min離心30min,在617 nm處測定上清液的吸光度值,并以不加菌的脫色培養(yǎng)基為對照,計算脫色率,以脫色率的大小來表示染料的脫色能力.

式中,A為不加菌液的吸光度值,B為接菌培養(yǎng)一定時間后上清液的吸光度值,選擇脫色效果好的菌株進行鑒定.

1.2.4 菌株鑒定

參照《伯杰氏細菌鑒定手冊》[10]和《一般細菌常用鑒定方法》[11]對分離純化后的菌株進行形態(tài)特征、生理生化特征、菌體染色等鑒定.

B2菌株和B6菌株進一步采用美國BD phoenixTM全自動細菌鑒定/藥敏系統(tǒng)自動鑒定,由福建省疾病控制中心完成.

2 ·結(jié)果與討論

2.1 篩選結(jié)果

經(jīng)過篩選,得到了7株對三苯甲烷染料堿性孔雀綠有比較好的脫色效果的細菌(見表1), 7株菌株分別編號為B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7.

由表1可知,不同的菌株對染料脫色效果不同, B2菌株脫色效果最好,脫色率高達99.19%.

2.2 初步鑒定

2.2.1 菌體染色結(jié)果

不同菌株染色結(jié)果如表2所示.

2.2.2 培養(yǎng)特征

菌株在營養(yǎng)瓊脂平板上劃線,于28℃培養(yǎng)18~24 h,觀察菌落的形態(tài)、大小和生長情況.B1菌株:菌落為淡黃色,菌落偏小,直徑為3~4 mm,邊緣圓整,規(guī)則,放射狀,臍狀.