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5.1試樣

經(jīng)WXP整理劑(乳液)處理后的織物(毛巾)(整理劑有效濃度為0.5%);對(duì)照樣品為普通織物(毛巾)。

5.2試驗(yàn)方法

試驗(yàn)用HBsAg的制備：用含小牛血清的PBS，將HBsAg稀釋成濃度為l0Oμg/mL、含5%小牛血HBsAg懸液，置于-2OC冰箱中備用。

樣本及對(duì)照片的制備：以無(wú)菌操作，用滅菌剪刀將末經(jīng)洗滌的樣品織物(毛巾)與對(duì)照織物(毛巾)分別制成1cm×1cm的樣片和對(duì)照樣片，置于無(wú)菌小試管內(nèi)(1片/支)備用。

5.3 WXP整理劑(乳液)中和劑鑒定試驗(yàn)

第1組：將HBsAg懸液2OμL滴加于樣片上，將小試管置于20±2℃水浴中，作用3h；加入lmL含10%小牛血清PBS，浸泡lOmin；振蕩試管，洗下HBsAg。一式兩份，各取樣0.1mL進(jìn)行檢測(cè)。

第2組：將HBsAg懸液2OμL滴加于樣片上，將小試管置于20±2℃水浴中，作用3h；加入lmL含10%小牛血清中和劑溶液的試管中，浸泡lOmin；振蕩試管，洗下HBsAg。一式兩份，各取樣0.lmL進(jìn)行檢測(cè)。

第3組：將HBsAg懸液2OμL滴加于對(duì)照片上，將小試管置于20±2℃水浴中，作用3h；用滅菌鑷子，將污染HBsAg的對(duì)照片加入含lmL中和產(chǎn)物溶液(一片樣片加lmL中和劑溶液，振打混勻，中和lOmin)的試管中，浸泡lOmin；振蕩試管，洗下HBsAg。一式兩份，各取樣0.lmL進(jìn)行檢測(cè)。

第4組：將HBsAg懸液2OμL滴加于對(duì)照片上，將小試管置于20±2℃水浴中，作用3h；加入1mL中和劑，浸泡lOmin;振蕩試管，洗下HBsAg。一式兩份，各取樣0.lmL進(jìn)行檢測(cè)。

第5組：將HBsAg懸液2OμL滴加于對(duì)照片上，將小試管置于20±2℃水浴中，作用3h；加入1mL含l0%小牛血清PBS溶液的試管中，浸泡lOmin；振蕩試管，洗下HBsAg。一式兩份，各取樣0.1mL進(jìn)行檢測(cè)。

第6組：向含有一樣片的小試管內(nèi)加入lmL中和劑，中和lOmin；振蕩混勻，取樣0.lmL進(jìn)行檢測(cè)。

第7組：向含有一樣片的小試管內(nèi)加入1.O mL lO%的PBS溶液，振蕩混勻。一式兩份，各取樣0.lmL進(jìn)行檢測(cè)。

第8組：一式兩份，各取0.1mL試驗(yàn)用含10%小牛血清的PBS溶液進(jìn)行檢測(cè)。

5.4 WXP織物滅活HBsAg病毒試驗(yàn)

試驗(yàn)時(shí)，將樣片放于無(wú)菌小試管內(nèi)(勿使樣片的中央部分與小試管底部接觸)，分別標(biāo)記試驗(yàn)濃度和作用時(shí)間。每個(gè)濃度和作用時(shí)間各取兩個(gè)樣片，將盛有樣片的小試管，置于20±2℃水浴內(nèi)10min，然后用微量移液器吸取HBsAg懸液20μL，滴于樣片中央。待作用至規(guī)定時(shí)間，向小試管內(nèi)加入lmL中和劑，進(jìn)行檢測(cè)。每一劑量檢測(cè)2個(gè)樣本，取兩者的平均OD值計(jì)算S/N值。S/N值小于2.1時(shí)為陰性，表明可以破壞或滅活乙肝病毒HBsAg表面抗原。

陰性對(duì)照為一片樣片加lmL中和劑，作用lOmin的中和產(chǎn)物。陽(yáng)性對(duì)照為lmL中和產(chǎn)物加污染HBsAg的對(duì)照片l片，污染HBsAg時(shí)間和試驗(yàn)組作用時(shí)間相同。陰性及陽(yáng)性對(duì)照，每個(gè)時(shí)間各取3個(gè)樣本檢測(cè)，與試驗(yàn)相同。

5.5結(jié)果

5.5.1中和劑鑒定試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)3次重復(fù)試驗(yàn)，第1組S/N值為1.35，第2組S/N值為5.59，第3、4、5組S/N值分別為253.93、260.67、259.67，且3、4、5組之間誤差率為l.04%。由此證明，所用中和劑在試驗(yàn)中可中和殘留WXP整理劑(乳液)消毒液對(duì)HBsAg抗原性的破壞作用，且中和劑和中和產(chǎn)物對(duì)HBsAg的抗原性及檢測(cè)系統(tǒng)無(wú)明顯影響(參見(jiàn)表1)。

5.5.2經(jīng)WXP整理后的織物對(duì)HBsAg抗原性破壞(滅活)結(jié)果

經(jīng)3次試驗(yàn)證明，經(jīng)WXP整理后的織物，作用時(shí)間為5-360min時(shí)，尚不能完全滅活(即破壞)HBsAg病毒，樣品仍呈陽(yáng)性；作用480min，S/N值分別為1.74、1.50和2.06，均小于2.1，為陰性(見(jiàn)表2、表3)。