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過氧化氫酶TF-160的酶活測定及其應(yīng)用

來源:印染在線 發(fā)布時間:2009年10月16日

俞英珍,陳紅梅(浙江傳化股份有限公司,浙江蕭山311215)

0 前言 棉制品氧漂處理后,若布面和水浴中殘留雙氧水,將破壞活性染料的反應(yīng)性基團(tuán),使染料與棉纖維之間不能形成有效共價鍵,造成色淺、色花等染疵。對此,傳統(tǒng)方法采用大量熱水反復(fù)清洗來去除,這樣不僅要耗費(fèi)大量的水、電、汽,工藝冗長,且去除不完全,影響產(chǎn)品質(zhì)量。采用過氧化氫酶對漂白后的棉制品進(jìn)行處理可有效解決這些問題。另外,作為天然發(fā)酵的蛋白質(zhì),過氧化氫酶可生物降解,具有優(yōu)良的環(huán)保性能。 過氧化氫酶的酶活測試有多種方法,如測定反應(yīng)體系中生成氧氣的量,有測壓法、電極法等;測定反應(yīng)剩余過氧化氫的量,一般有高錳酸鉀法、碘量法;直接測定反應(yīng)消耗的過氧化氫的量,則常用紫外速率法。由于碘量法簡便、快速,且易操作,因而被廣泛應(yīng)用。酶的生產(chǎn)方式、發(fā)酵條件及反應(yīng)性不同,因而其活力對每一個反應(yīng)條件都較敏感。了解其中機(jī)理及影響因素,對測定酶的活力值具有指導(dǎo)作用,而嚴(yán)格規(guī)范操作,呵以得到準(zhǔn)確的測試結(jié)果。l 試驗(yàn)I.I試劑 1.8 mol/L硫酸,20%碘化鉀溶液,10%七鉬酸六銨溶液,0.5%淀粉指示劑,0.05 mol/L過氧化氫底物溶液,0.1 mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液,TF-160過氧化氫酶。1.2操作步驟1.2.1 過氧化氫酶溶液的配制 取l mL過氧化氫酶TF-160原液,用蒸餾水稀釋,定容至500 mL以備測試。1.2.2酶促反應(yīng) 吸取一定量的酶稀釋液于250 mL碘量瓶中,按照表1的操作以及相關(guān)溶液的用量,進(jìn)行過氧化氫酶酶活的測試,同時做空白試驗(yàn)。根據(jù)酶活定義,計(jì)算過氧化氫酶酶活力值。 表1 過氧化氫酶酶活分析測試步驟及取液情況 注:酶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用,并注意搖勻,以使反應(yīng)完全。1.3 過氧化氫酶TF.160應(yīng)用工藝 漂白后先冷洗或噴洗。 過氧化氫酶TF一160/(g/L) 間歇式設(shè)備0.05~0.1 連續(xù)式設(shè)備0.5~3溫

度/℃ 20~30

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