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中山民森-果膠酶在棉織物前處理中的應用(三)
來源:印染在線 發(fā)布時間:2009年08月17日
根據(jù)酶促反應動力學的米氏學說[3],從酶被底物飽和的現(xiàn)象出發(fā),按照“穩(wěn)態(tài)平衡”假說的設想,可推導出如下公式:產(chǎn)物生成速率=k3[總酶][底物],([底物]+km)(1)式中:[總酶]——酶的總濃度(mol/mL);[底物]——底物濃度(mol/mL);k3——在酶促反應的第二步,形成最終產(chǎn)物的速率常數(shù);km——米氏常數(shù)(mol/mL),其值是當酶反應速率達到最大反應速率一半時的底物濃度。要估計[總酶],首先要固定所有可控制的獨立變量,如pH值、溫度等。當[底物]Km時,底物對反應速率的影響可忽略(酶飽和),酶促反應達到最大反應速率Vmax,其結果是:產(chǎn)物生成速率=k3[總酶]=Vmax=UU就成為總酶量的一種測量。因此,可以通過測定u來反映酶制劑中有效酶蛋白的含量。2、方法簡介粘度降低法:果膠溶于水后形成粘稠狀溶液,其粘度和溶解度與其聚合和酯化程度有關??梢岳霉z的這種性質,測其酶活力。即在一定溫度、酶濃度下和一定反應時間內,測定標準果膠溶液粘度的降低率。滴定法:果膠酶徹底水解果膠,生成半乳糖醛酸;半乳糖醛酸可與碘(過量)反應。反應后剩余的碘可用硫代硫酸鈉溶液滴定,據(jù)此可得出酶解反應產(chǎn)生的半乳糖醛酸的量。以生成半乳糖醛酸的量衡量果膠酶的活力。分光光度法:果膠酶分解果膠,產(chǎn)生帶有還原性醛基的還原糖(以半乳糖醛酸計),一些顯色劑可與其發(fā)生顯色反應。根據(jù)顏色深淺的不同,可以通過分光光度計測定果膠酶酶活值的大小。最常用的是DNS比色法,其顯色劑為3,5-二硝基水楊酸。橫向比較:將粘度降低法用來測定果膠酶的復合酶活力比較準確,但操作過程也相對復雜,且測定靈敏度不高。滴定法設備使用簡單,測試重現(xiàn)行好,準確度高,但測定時間長,過程較繁瑣,試劑用量較大。而分光光度法測定
的靈敏度、準確度均高,重現(xiàn)性好,試劑用量少,尤其是操作省時、簡便。對于上述3種測定方法,根據(jù)紡織行業(yè)的特點,我們認為分光光度法更適于紡織工作者應用。
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