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紡織染料血細胞染色技術(shù)

來源：印染在線　發(fā)布時間：2010年04月21日

郝冀洪,任貴云,李順義

紡織染料可染血細胞和骨髓中血細胞,有的可替代細胞化學染色,也有的可區(qū)分TH (CD4) 細胞和TC/ TS 細胞(CD) 細胞。近年Kass又進行了禽類血細胞染色,并取得了滿意結(jié)果,已引起國內(nèi)檢驗界的高度重視。自從“紡織染料在血細胞形態(tài)學檢驗中的應(yīng)用”一文在《中華檢驗醫(yī)學雜志》發(fā)表后,陸續(xù)收到各地讀者來信或電話,詢問有關(guān)紡織染色有關(guān)技術(shù)問題,為了促使這一技術(shù)盡快在國內(nèi)推廣,同時為國產(chǎn)紡織染料擴大應(yīng)用范圍,現(xiàn)就國內(nèi)外利用紡織染料染色血細胞技術(shù)問題綜述如下。

1 標本制備1. 1 紡織染料血細胞染色:所用的標本可采用末梢血涂片、骨髓涂片和外周靜脈抗凝血濃集涂片等。1. 2 靜脈抗凝血濃集涂片:通常抽取患者外周靜脈血于含有乙二胺四乙酸的抗凝管中,在室溫靜置2h ,使紅細胞自然沉降。用移液管從抗凝管中提取富含白細胞的血漿于離心管中,以2 500 r/ min 離心5 min ,移去上清液,剩下0. 1 mL 富含白細胞和血小板濃集液。用濃集細胞制成濃集涂片,晾干。

2 固定液固定是血細胞染色的重要步驟,紡織染料染色所用的固定液與傳統(tǒng)的細胞化學染色方法所用固定液基本相同。Kass 常用的有Bouin 固定液(苦味酸飽和液75 mL ,冰乙酸5 mL , 37 %甲醛20 mL ) 、FAA 固定液(這是紡織染料血細胞染色常用的固定液,由95 %乙醇90 mL ,37 %甲醛5 mL 和冰乙酸5mL 配制而成, 嚴格密封于室溫下保存1 年) 、甲醇。另外,國內(nèi)外有的將紡織染料的甲醇液或乙醇液直接加在涂片上,使固定和染色同步進行。

3 紡織染料3. 1 國外紡織染料: 堿性藍122 , C. I. basic blue122 ,basacryl blue X4GFL (BASF ,Whippany ,NJ ) ;堿性藍141 , C. I. b

asic blue 141 , basacryl blueX7GFL (BASF ,Whippany ,NJ ) ; 堿性藍148 ,C. I.basic blue 148 , Remacryl blue 4RL ( Hoechst ,Frankf urt) ;堿性藍54 ,C. I. basic blue 54 ,basacrylblue GF (BASF , Charlot te ,NC) ; 堿性藍41 , C. I.basic blue 41 , Remacryl blue BRL ( Hoechst ,Charlot te ,NC) ; 堿性藍75 , C. I. basic blue 75 ,Ast razon blue 9GL (BASF ,Charlot te ,NC) ;酸性紅52 ,acid red 52 ( Int racide rhodamine B Cromptonand Kndwles ,Charlot te ,NC) ;酸性紅360 ,acid red360 ( Telon Fast Red AFG,Mobay Chemical Co ,Pit t sburgh ,PA) ; 酸性紅137 ; Synacril 黑; 堿性藍93 。

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