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pH對酶及酶的穩(wěn)定性的影響

來源:印染在線 發(fā)布時間:2010年03月02日

一、pH對酶的影響 酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),具有兩性電解質(zhì)的性質(zhì),在一定溶液中可以發(fā)生解離作用。酶在水溶液環(huán)境中的解離狀態(tài)和行為,都受到H+的影響。酶活性中心功能基團(tuán)的解離狀態(tài)隨著溶液的pH值改變而改變,因此,溶液的H+濃度對酶催化反應(yīng)的速度有明顯的影響,而且其影響機(jī)理非常復(fù)雜。這是因?yàn)樵诿阜肿拥幕钚圆课簧暇哂泻芏嗟乃嵝曰驂A性氨基酸的側(cè)鏈基團(tuán),它們可隨著pH的變化而發(fā)生解離,并屬于不同的正負(fù)高價離子或等電荷狀態(tài),它們將直接影響到酶的活化以及酶與底物的親和力。有些酶需要高濃度的氫離子才能活化,例如胃蛋白酶原只有在pH 1.8左右時才可以活化為胃蛋白酶。絕大多數(shù)酶類都可以因酶分子表面極性基團(tuán)的解離而改變酶活性部位的原有構(gòu)象,或改變輔酶、輔基或活化因子的結(jié)合,從而導(dǎo)致酶催化反應(yīng)速度的變化,另一方面,pH亦影響到酶促反應(yīng)的進(jìn)行??傊?,pH是決定酶催化活性的重要參數(shù)之一,pH變化能使酶活力提高或下降。在生理生化反應(yīng)中,我們可以通過調(diào)控pH值,提高某種酶的活力,而降低其他酶的干擾作用。在工業(yè)生產(chǎn)上,特別是利用大型生物反應(yīng)器時,調(diào)控反應(yīng)系統(tǒng)的pH以控制酶活力往往是生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵。因此,研究pH對酶促反應(yīng)的影響是探討酶催化作用機(jī)理的重要手段之一。 不同的酶,氨基的組成不同,則酶分子中可解離的基團(tuán)性質(zhì)不同,這些基團(tuán)隨著pH的變化可以處于不同的解離狀態(tài),側(cè)鏈基團(tuán)的不同解離狀態(tài)即可以影響底物的結(jié)合和進(jìn)一步的酶催化反應(yīng)、也能影響酶的空間構(gòu)象,從而影響到酶的催化活性。pH對酶活性的影響主要有以下幾個方面: 1.過酸或者過堿都可以使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞,而引起酶的變性,導(dǎo)致酶活力的下降。這種酸堿的失活作用一般有兩種情況,可逆的失活和不可逆的失活。當(dāng)適當(dāng)?shù)馗淖內(nèi)芤旱膒H值,酶活力可以恢復(fù)的為可逆的失活(reversible inactivation),否則,為不可逆的失活(irreversible inact

ivation)。 2.酸或堿影響酶活性中心結(jié)合基團(tuán)的解離狀態(tài),使得底物不能和酶結(jié)合。 3.酸或堿影響酶活性中心催化基團(tuán)的解離狀態(tài),使得底物不能被酶催化成產(chǎn)物。 4.酸或堿影響底物的解離狀態(tài),或者使底物不能與酶結(jié)合或者結(jié)合后不能生成產(chǎn)物。 由于上述種種原因,每種酶對于某一特定的底物,在一定的pH值下,均具有最大的反應(yīng)速度值,或者說具有一個最高的酶活力,這一特定的pH值,就是該種酶的最適pH值(Optimum pH)。 最適pH值不是酶的一個物理特征常數(shù),它隨著溫度,所催化底物的種類以及緩沖液的特性和離子強(qiáng)度等綜合因素的改變而有所變化,應(yīng)給予足夠的重視。不同的酶,表面構(gòu)象各有特點(diǎn),其發(fā)揮作用的pH范圍有差異,其最適pH的范圍也不相同。有的酶要求偏酸環(huán)境,例如哺乳動物胃蛋白酶和捕蠅草的蛋白酶作用的pH在1.2-2.5,最適pH為1.8,相當(dāng)于0.1 mol/L HCl的酸強(qiáng)度。有的酶要求偏堿的環(huán)境,例如堿性磷酸酶作用的pH在9-11,最適pH為10.1??傊?,各種酶有各自固有的作用pH范圍,有各自的最適pH值。同工酶的最適pH值也可以有很大的差別,如同一物種所產(chǎn)生的磷酸酯酶,酸性酶的最適pH值為4.5,與堿性酶的最適pH值相差將近6。同物種的同性質(zhì)酶最適pH值也可以有差別,胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶的最適pH值與胃蛋白酶的最適pH值相差也達(dá)5~6。


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